Диализ принцип метода

Методы выделения белков

Для выделениянативныхбелков (безизменения пространственной структуры)из биологического раствора используютметоды:

• высаливание: осаждение солями щелочных, щелочноземельных металлов (хлорид натрия, сульфат магния), сульфатом аммония; при этом не нарушается первичная структура белка;
• осаждение: использование водоотнимающих веществ: спирт или ацетон при низких температурах (около –20 С).

При использованииэтих методов белки лишаются гидратнойоболочки и выпадают в осадок в растворе.

Денатурация— нарушение пространственной структурыбелков (первичная структура молекулысохраняется). Может быть обратимая(структура белка восстанавливаетсяпосле устранения денатурирующегоагента) или необратимая (пространственнаяструктура молекулы не восстанавливается,например, при осаждении белков минеральнымиконцентрированными кислотами, солямитяжелых металлов).

Методы разделения белков Отделение белков от низкомолекулярных примесей

Диализ

Используютспециальную полимерную мембрану, котораяимеет поры определенной величины. Малыемолекулы (низкомолекулярные примеси)проходят через поры в мембране, а крупные(белки) задерживаются. Таким образом,белки отмывают от примесей.

Разделение белков по молекулярной массе

Гель-хроматография

Хроматографическуюколонку заполняют гранулами геля(сефадекс), который имеет поры определеннойвеличины. В колонку вносят смесь белков.Белки, размер которых меньше, чем размерпор сефадекса, задерживаются в колонке,так как «застревают» в порах, а остальныесвободно выходят из колонки (рис. 2.1).Размер белка зависит от его молекулярноймассы.

Рис. 2.1.Разделение белков методом гель-фильтрации

Ультрацентрифугирование

Этот метод основанна различной скорости седиментации(осаждения) белковых молекул в растворахс различным градиентом плотности(сахарозный буфер или хлорид цезия)(рис. 2.2).

Рис. 2.2.Разделение белков методомультрацентрифугирования

Электрофорез

Данный методоснован на различной скорости миграциибелков и пептидов в электрическом полев зависимости от заряда.

Носителями дляэлектрофореза могут служить гели,ацетатцеллюлоза, агар.

Разделяемыемолекулы движутся в геле в зависимостиот размера: те из них, которые имеютбóльшие размеры, будут задерживатьсяпри прохождении через поры геля.

Меньшиемолекулы будут встречать меньшеесопротивление и, соответственно,двигаться быстрее. В результате, послепроведения электрофореза, бóльшиемолекулы будут находиться ближе кстарту, чем меньшие (рис. 2.3).

Рис.2.3. Разделениебелков методом электрофореза в геле

Методомэлектрофореза можно разделить белки ипо молекулярной массе.Для этого используют электрофорезв ПААГ в присутствии додецилсульфатанатрия (ДДS-Na).

ДДС-Na является дифильным веществом и содержит заряженную группу и гидрофобную. Белки связываются с ДДС-Na своими гидрофобными радикалами и при этом денатурируют. Таким образом, белки выравниваются по форме и заряду. После этого подвижность белка при электрофорезе зависит только от его молекулярной массы.

Додецилсульфат натрия (ДДС-Na)

Выделениеиндивидуальных белков

Аффиннаяхроматография

Метод основан наспособности белков прочно связыватьсяс различными молекулами нековалентнымисвязями. Используется для выделения иочистки ферментов, иммуноглобулинов,рецепторных белков.

Молекулы веществ(лиганды), с которыми специфическисвязываются определенные белки,ковалентно соединяют с частицамиинертного вещества. Смесь белков вносятв колонку, и искомый белок прочноприсоединяется к лиганду. Остальныебелки свободно выходят из колонки.

Задержанный белок затем можно вымытьиз колонки с помощью буферного раствора,содержащего в свободном состояниилиганд.

Этот высокочувствительный методпозволяет выделить в чистом виде оченьмалые количества белка из клеточногоэкстракта, содержащего сотни другихбелков.

Изоэлектрофокусирование

Метод основан наразличной величине ИЭТ белков. Белкиразделяют методом электрофореза напластине самфолином (это вещество, у которогозаранее сформирован градиент pH вдиапазоне от 3 до 10). При электрофорезебелки разделяются в соответствии созначением их ИЭТ (в ИЭТ заряд белка будетравен нулю, и он не будет передвигатьсяв электрическом поле).

Двухмерныйэлектрофорез

Представляет собойсочетание изоэлектрофокусирования иэлектрофореза с ДДС-Na.Проводят сначала электрофорез вгоризонтальном направлении на пластинес амфолином. Белки разделяются взависимости от заряда (ИЭТ).Затем обрабатывают пластину растворомДДС-Na и проводят электрофорез ввертикальном направлении. Белкиразделяются в зависимости от молекулярноймассы.

Иммуноэлектрофорез(Вестерн-блот)

Аналитическийметод, используемый для определенияспецифичных белков в образце (рис 2.4).

Этапы:

1. Выделение белков из биологического материала.

2. Разделение белков по молекулярной массе методом электрофореза в ПААГ с ДДС-Na.

3. Перенос белков с геля на полимерную пластину с целью облегчения дальнейших работ.

4. Обработка пластины раствором неспецифического белка для заполнения оставшихся пор.

Такимобразом, после этого этапа полученапластинка, в порах которой содержатсяразделенные белки, а пространство междуними заполнено неспецифическим белком.Теперь надо выявить, есть ли среди белковискомый, ответственный за какое-тозаболевание. Для выявления используютобработку антителами. Под первичнымиантителами понимают антитела к искомомубелку.

Под вторичными антителами понимаютантитела к первичным антителам. В составвторичных антител вводят дополнительноспециальную метку (т.н. молекулярныйзонд), чтобы потом можно было визуализироватьрезультаты. В качестве метки используютсярадиоактивный фосфат или фермент, прочносвязанные с вторичным антителом.

Связывание сначала с первичными, а затемс вторичными антителами преследует двецели: стандартизация метода и улучшениерезультатов.

1. Обработка раствором первичных антител  связывание происходит в том месте пластины, где есть антиген (искомый белок).

2. Удаление несвязавшихся антител (промывка).

3. Обработка раствором меченых вторичных антител для последующей проявки.

4. Удаление несвязавшихся вторичных антител (промывка).

5. Проявка — авторадиография в случае использования радиоактивного фосфата или обработка пластины раствором субстрата — в случае ферментной метки.

Рис.2.4.Иммуноэлектрофорез (Вестерн-блот)

В случае присутствияискомого белка в биологическом материале– на пластинке появляется полоса,свидетельствующая о связывании этогобелка с соответствующими антителами.

Источник: https://studfile.net/preview/3883713/page:4/

Что такое диализ: общая информация и специфика процедуры

Сбои в работе почек приводят к нарушениям функционирования других важных для жизни и здоровья человека органов. Задержавшаяся в организме жидкость влияет на развитие болезней сердца, вызывает отек легких, увеличивает давление.

Диализ — это медицинская процедура, цель которой — очищение крови. Гемодиализ часто единственный выход при хронических заболеваниях почек. Благодаря проведению процедуры очищения выводятся шлаки, стабилизируется давление, улучшается состояние больного.

Общая информация

Диализ — широко распространенный в медицине метод, под которым подразумевают внепочечную искусственную фильтрацию крови.

Эта процедура жизненно необходима пациентам с почечной недостаточностью. Однако важно понимать, что такое мероприятие, как диализ почки, не является лечением. Метод позволяет избавить организм от скопившихся токсинов, очистить его от продуктов метаболизма.

Очистка почек проводится в стационаре, на специальном оборудовании, под присмотром медицинского персонала. Как правило, процедура диализа длится долго, что нередко отрицательно сказывается на самочувствии пациентов, их общем настрое.

Виды диализа

Тяжелые почечные заболевания серьезно влияют на здоровье людей. Диализ почек — возможность для пациентов с патологиями этих органов не просто улучшить самочувствие, а продлить жизнь.

Эта процедура дорогостоящая, однако современные больницы предлагают специальные аппараты для проведения очистки крови всем пациентам.

Существует три вида диализа почек. Первых два — перитонеальный и гемодиализ — считаются наиболее эффективными. Третий — кишечный диализ, менее популярен, но бывает незаменим как паллиативная мера при недоступности других видов. Определить, какой тип очищения необходим пациенту, должен врач.

Гемодиализ

Суть гемодиализа заключается в диффузии (обмене молекул и последующем выравнивании их концентрации в двух веществах) токсических веществ путем применения полупроницаемой мембраны. Одна сторона этой мембраны взаимодействует с кровью, другая — со специальным раствором.

Взаимодействие всей крови и раствора приводит к ультрафильтрации — выведению избытка жидкости из организма с одновременным удалением из нее вредных веществ.

Благодаря гемодиализу происходит:

• выведение уремических ядов,
• понижение уровня мочевины и креатинина в крови,
• корректировка кислотного баланса,
• снижение артериального давления с помощью выведения воды и натрия,
• неврологические проявления, связанные с отравлением организма, уменьшаются.

При этом для устранения анемии или перикардита важно не пренебрегать лечением, проводимым до гемодиализа.

Перитонеальный диализ

При этом способе диализа очищение крови происходит за счет смены особых растворов в брюшной полости человека. Роль мембраны выполняет брюшина больного. Применение перитонеального метода необходимо:

в ситуациях, когда у пациента нет возможности очистить организм в специальном медицинском учреждении,
при наличии серьезных противопоказаний для проведения гемодиализа.

Кишечный диализ

Такой способ очищения предполагает использование в качестве мембраны стенок толстого кишечника. Благодаря кишечному очищению происходит уменьшение в крови уровня аммиака, мочевины и прочих вредных для организма веществ, накопление которых происходит при некоторых болезнях почек и печени.

Помимо этого, кишечное очищение дает хорошие результаты при отравлениях, по время которых все вредные вещества выводятся с каловыми массами. Также применение метода оправдано при интоксикациях, с которыми бы отлично справились здоровые почки.

Показания и противопоказания

Наиболее распространенные показания к проведению диализа — острая и хроническая почечная недостаточность.

В первом случае из организма выводятся продукты белкового обмена, стабилизируется показатель солевого состава крови. При острой стадии патологии это медицинское мероприятие является лишь временной, способствующей восстановлению работы пораженного органа, мерой, совмещаемой с другими методами лечения.

Пациентам с хронической почечной недостаточностью процедура диализа помогает дождаться пересадки органа либо просто продолжать жить.

Помимо почечной недостаточности, высокая концентрация в крови больного вредных веществ предполагает проведение искусственного очищения при:

• серьезных нарушениях электролитного баланса крови,
• критическом избытке жидкости в организме (отек легких, головного мозга), которая не выводится при консервативном лечении,
• серьезных отравлениях спиртами, лекарствами.

Любая медицинская манипуляция имеет противопоказания. Диализ, несмотря на его колоссальную помощь организму в ситуациях, когда отказывают почки, не исключение. Запрещено проводить процедуру искусственного очищения крови при следующих болезнях:

• рак крови,
• злокачественные опухоли,
• тяжелые патологии неврологического характера,
• сложные психические заболевания,
• тяжелые нарушения функций сердечно-сосудистой и дыхательной системы,
• пожилой возраст пациента (более 80 лет).

Также по решению врача возможными противопоказаниями могут стать:

• тяжелая форма диабета,
• амилоидоз тяжелой стадии,
• открытая форма туберкулеза легких,
• красная волчанка,
• язвы органов ЖКТ.

Проведение процедуры

Диализ почек предполагает предварительное тщательное обследование, после которого пациенту назначают тот или иной тип процедуры. Выбор метода зависит от состояния здоровья больного, рекомендаций врача и возможностей медицинского учреждения.

Проведение гемодиализа

Как правило, гемодиализ проводится в больницах, оснащенных необходимым оборудованием и расходными материалами. Однако существуют и портативные устройства, позволяющие очищать кровь вне медицинских учреждений.

Для проведения гемодиализа в условиях стационара необходимы:

• аппарат для подачи крови,
• мембрана,
• устройство, подающее и подготавливающее диализирующую смесь.

При гемодиализе происходит фильтрация крови, из которой после попадания в аппарат удаляются вредные соединения, соли, мочевина. При этом во время гемодиализа в кровь поступают вещества из диализирующего раствора, т. е. происходит диффузия через специальную мембрану. После этого кровь подается обратно в организм.

Выполнение перитонеального метода

Этот почечный диализ подразумевает ввод пластикового катетера в районе живота, на несколько сантиметров ниже пупка.

Проксимальный (находящийся ближе к центру) отдел катетера сдвигают вверх, в область подкожного тоннеля, предотвращая таким образом попадание инфекции в брюшину. Конец трубки выводится наружу через специальное отверстие в коже.

С помощью катетера вводят необходимое количество жидкости, которое спустя некоторое время выводится из организма вместе с вредными веществами.

Возможно проведение процедуры двумя способами: постоянным и автоматическим. В первом случае смесь вводится в организм на период не менее 6 часов, после чего она выводится наружу. Процедура должна проводиться несколько раз на протяжении суток.

При автоматическом способе раствор подается и выводится только ночью, доставляя больному гораздо меньше неудобств.

Проведение кишечного диализа

Процесс очищения похож на промывку кишечника обычной клизмой. Но зачастую процедура подразумевает применение не только сифонных клизм, но и специального оборудования для гидроколонотерапии. Очистка проводится многократно.

Во время этого мероприятия вредные вещества проходят сквозь ткани кишечника в диализирующую смесь. Происходит это благодаря осмотическому давлению на раствор.

Клизма при кишечном очищении состоит не из воды, а из специального диализного раствора, где выдержано нужное соотношение глюкозы, калия, магния и других необходимых элементов.

Возможные осложнения

Диализ почек, вне зависимости от вида, — стресс для организма. Несмотря на то что вероятность их появления невелика, осложнения и последствия при диализе почек все же есть.

Поэтому каждому пациенту важно знать не только особенности процедуры, но и то, как она влияет на организм. Так, последствиями данного метода очищения могут быть:

• головная боль, тошнота, рвота, судороги, повышенное артериальное давление, потеря сознания,
• пониженное артериальное давление — возникает на фоне увеличенной ультрафильтрации во время процедуры,
• повышение температуры тела — появляется, как правило, в результате бактериального загрязнения устройств для проведения процедуры,
• воздушная эмболия — попадание во время медицинских манипуляций пузырьков воздуха в кровь пациента,
• кровотечения из носа и органов ЖКТ,
• искривления мембраны диализатора,
• заражения вторичной инфекцией (как правило, это гепатит В или пневмония),
• алюминиевая болезнь — возникает вследствие высокой концентрации алюминия в воде для приготовления раствора (проявляется суставными болями, мышечной слабостью, хрупкостью костной ткани, речевыми расстройствами, гидроцефалией),
• кисты почек приобретенного характера,
• известны ситуации, когда у больного наблюдалась аллергическая реакция на один из компонентов вводимого раствора, в этом случае надо срочно сообщить о проблеме врачу.

Сколько живут люди на диализе

Искусственное очищение почек — шанс на жизнь для людей, страдающих почечной недостаточностью. С помощью диализа многие пациенты не просто живут, но и остаются практически полностью работоспособными. Относительно недавно люди с серьезными болезнями почек жили не более 5–7 лет.

На сегодня, благодаря современному оборудованию и материалам, искусственное очищение организма может продлить жизнь больным до 20, а иногда и более лет.

Помимо этого, благодаря достижениям медицины диализ часто делают при помощи портативных аппаратов, что позволяет прожить не просто долгую, но и более качественную, без частого посещения больниц, жизнь.

Загрузка…

Источник: https://KardioBit.ru/pochki/lechenie/pokazaniya-i-protivopokazaniya-dializa

Диализ почек – что это такое, как делают и сколько живут на диализе

Какие существуют виды диализа? Выделяют гемодиализ и перитонеальный тип процедуры.

Гемодеализ

Гемодиализ – процедура, при которой кровь, проходя через специальный аппарат и очищаясь там, поступает обратно в организм.

При этом почки не нагружаются лишней работой, им нет необходимости фильтровать шлаки, соли и другие вредные продукты. Делают манипуляцию приблизительно дважды в неделю, возможно ее выполнение в домашних условиях, что удобно для многих пациентов.

Методика проведения

Разница в методиках проведения при обоих разновидностях процедуры не столь существенна. В обоих случаях почки получают меньшую нагрузку, за счет чего появляется шанс их восстановления. При этом также проводится, по усмотрению врача, лечение других патологий, которые требуют коррекции.

Для проведения процедуры в обоих случаях используется специальный аппарат.

Диета

Если пациента необходимо лечить или поддерживать диализом, важным этапом его восстановления становится диета. Часто врачи также регулируют питьевой режим, чтобы дополнительно снять нагрузку с почек.

Пациентам необходимо будет:

• исключить из диеты слишком соленые продукты;
• отказаться от сладкого;
• отказаться от выпечки;
• избегать майонеза;
• не употреблять черный чай и сладкую газировку;
• не есть ничего острого.

Рекомендуется в больших количествах употреблять различные вегетарианские блюда, овощные супы, фрукты и овощи. Сладкое в рационе можно заменить медом, орехами. Придется насытить диету большим количеством углеводов, жиров и белков.

Осложнения

Почки, которые по каким-либо причинам не могут выполнять свои функции – это серьезная проблема. Однако и процедура диализа связана с рядом осложнений, лечение которых бывает затруднено особенно после первых нескольких процедур.

Если пациенту делают гемодиализ, возможно развитие тошноты и рвоты, анемии, которая сопровождается слабостью, снижением работоспособности, потерями сознания и другими неприятными явлениями.

Перитонеальная процедура, если она сделана неправильно, опасна перитонитом, который является осложнением, угрожающим жизни. Также возможно инфицирование раны, через которую устанавливается прибор и развитие разнообразных грыж.

Профилактика осложнений

Профилактика осложнений при манипуляции представляет довольно большую сложность. Прежде всего, необходимо информировать пациентов о возможных побочных эффектах, с которыми они могут столкнуться из-за проведения процедуры.

Также необходимо тщательно следить за чистотой послеоперационной раны, соблюдая все правила асептики и антисептики, особенно если диализ проводится в домашних условиях. Профилактике осложнений способствует также соблюдение диеты и всех предписаний, которые выдаются врачом.

Продолжительность жизни

Сколько люди живут на диализе почек? Раньше, когда методика только-только появилась в медицине, продолжительность жизни не превышала 10 лет, но и она уже была существенным прорывом, учитывая, что до этого патологии почек вообще корректировались с трудом.

Сейчас, когда совершенствуется и сама методика, и медицина в целом, появляется возможность годами жить на искусственном очищении крови. Есть пациенты, которые жили и 20, и 30 и даже 50 лет. Главное, чтобы не развились осложнения, которые значительно снижают выживаемость.

Методика искусственного очищения крови при различных патологиях почек стала настоящим спасением для большого количества пациентов. При правильности проведения процедуры и соблюдении рекомендаций она значительно увеличивает продолжительность жизни.

Источник: https://nefrologiya.pro/lechenie-i-profilaktika/dializ/dializ-pochek/

Показания к применению гемодиализа и перитонеального диализа

Диализ что это такое, в каких случаях необходим? В общих чертах, функция почек – поддерживать водно-солевой баланс в организме и фильтровать кровь от токсических соединений, образующихся в результате жизнедеятельности органов.

Иногда по разным причинам обе почки частично или, что ещё хуже, полностью, перестают справляться со своей задачей, и тогда очищать кровь становится некому и нечему. Организм попросту травится, и человек быстро умирает. Дабы избежать такого исхода и был придуман аппарат для диализа почек.

Какие способы диализа существуют, и является ли данная процедура панацеей при острой почечной недостаточности?

Разновидности диализа

На самых конечных стадиях хронической почечной недостаточности, когда почки оказываются неработоспособными на 85% и выше, возникает неиссякаемая потребность в искусственной очистке крови от токсинов.

В настоящее время существует два способа сделать это:

1. Прибегнуть к гемодиализу.
2. Воспользоваться перитонеальным диализом.

Эти виды диализа кардинально отличаются друг от друга принципом действия, но приводят к одному результату – избавлению организма от ядов и вредных веществ. Какой способ лучше, определит врач, исходя из состояния больного и его предпочтений.

Часто при острой почечной недостаточности делают гемодиализ. Этот метод представляет собой перегон крови через специальный белковый фильтр. Последний в медицине носит название диализатор и является главной частью гемодиализа, а аппарат для осуществления данной процедуры в народе называют искусственной почкой.

Принцип его действия основывается на удалении из крови молекул, вызывающих отравление, при помощи фильтра, который пропускает вещества большой молекулярной массы и задерживает более лёгкие соединения и компоненты, такие как:

• элементы семейства электролитов – калий, кальций и натрий;
• креатинин;
• мочевина и мочевая кислота.

Сначала из крупного кровеносного сосуда больного берётся неочищенная кровь и проходит систему очистки, после чего её заливают обратно.

Если прибегать к такому диализу приходится часто, в вену путём операции вживляется специальная фистула, обеспечивающая безболезненный доступ к крови. Если же регулярное очищение организма не планируется, обходятся обычной иглой.

В зависимости от того, насколько запущен патологический процесс в почках, длительность стандартного сеанса составляет до 6 часов.

Показания к применению гемодиализа не ограничиваются почечной недостаточностью. Его используют при сильной интоксикации организма алкоголем, медицинскими препаратами и другими ядами, проникновение которых в организм обусловлено другими причинами, не связанными с дисфункцией почек.

Прогноз жизни на диализе

Всех, у кого отказали почки, волнует вопрос, сколько живут на диализе почек. Нужно понимать, что жизнь на диализе коренным образом отличается от бытия здорового человека.

Тем, у кого есть прямые показания к проведению процедуры, приходится, мягко говоря, несладко. Чего стоят ежедневные визиты в медицинское отделение. Ведь это меняет весь образ жизни, лишает многих возможностей.

Человек не может уехать из своего города, так как он должен всё время находиться рядом с больницей, а то и в самой палате.

Поэтому почечный отказ и дальнейшие лечебные мероприятия – это всегда большая нагрузка на психику больного. Не все могут смириться с тем, что им придётся жить, будучи буквально привязанными к больнице, где проводят диализ.

К тому же, не всем разрешено проводить оба вида очищающих кровь процедур ввиду различных проблем со здоровьем.

Так сколько живут люди, «подсевшие» на диализ почек? Ещё совсем недавно, 10 лет назад, этот срок составлял от 3-х до 10-и лет, после чего больной умирал от множественных осложнений, бороться с которыми организм был не в силах.

За 10 лет аппараты для диализа сильно изменились, и многие больницы уже оснащены новым оборудованием. Так что сейчас на вопрос «сколько живут при диализе» можно смело ответить: 22 года. Это если придерживаться строгой диеты и следовать всем указаниям врача.

Однако при условии, что в организме являются больными только почки, а за всё время проведения очищающих процедур осложнений не возникает, прожить на аппарате «искусственная почка» можно и 30-50 лет.

Уже известны случаи, когда пациенты с ХПН жили такое количество лет.

Современные методики диализа почек отличаются такими качествами:

• безболезненностью — во время сеанса пациент может спать, заниматься своими делами, а также общаться с родственниками и друзьями напрямую или посредством видеосвязи, не испытывая при этом дискомфорта;
• высокой эффективностью – самочувствие больного заметно улучшается сразу после процедуры;
• совершенством – сводится к минимуму риск осложнений.

Длительность жизни при искусственной фильтрации крови зависит от того, насколько долго человек может обращаться к этой процедуре, поскольку без неё с почечной недостаточностью долго не прожить.

Речь сейчас идёт о цене вопроса. Несмотря на то, что диализ жизненно важен для некоторых людей, за него требуется платить. Стоимость одного сеанса в частных клиниках России может достигать восьми тысяч рублей, а за рубежом ценник составляет 200-250 долларов. В этом случае, чем больше у вас денег, тем дольше вы проживёте.

Но есть и больницы, финансируемые средствами из государственного бюджета. Там, как правило, диализ стоит копейки или вообще проводится бесплатно.

Теперь вы узнали, что такое диализ почек, как он осуществляется и какие имеет показания.

Остаётся надеяться, что революция в медицине перевернёт представление об искусственной почке, а бесплатный и доступный диализ в домашних условиях станет реальностью.

Источник: https://pochki2.ru/lechenie/dializ.html